Das Invitrogen Human Growth Hormone ELISA-Kit EHGH1 ist ein hochsensibles und präzises Verfahren zur quantitativen Bestimmung von menschlichem Wachstumshormon (hGH) in biologischen Proben. Es eignet sich für klinische Studien, diagnostische Labore und Forschungsprojekte, die exakte Messwerte benötigen.



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Funktionsweise




Immunoassay-Prinzip: Das Kit verwendet ein Sandwich-ELISA, bei dem das hGH in der Probe von einer spezifischen Capture-Antikörper-beschichteten Oberfläche gefangen wird.


Enzymatische Detektion: Ein sekundärer Enzym-konjugierter Antikörper bindet an das erfasste hGH. Durch Zugabe eines Substrats entsteht ein farbiger Signal, dessen Intensität proportional zur hGH-Konzentration ist.









Kit-Komponenten



Komponente Inhalt


Capture-Antikörper-beschichtete Mikroplatten Hochspezifische Antikörper gegen hGH


Enzymkonjugierter Sekundärantibody Horseradish Peroxidase (HRP) konjugiert


Substratlösung TMB (3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidin)


Stopplösung Schwefelsäure (0,2 M)


Standard-Konzentrationen 0–200 pg/mL (je nach Bedarf anpassbar)


Kontrollproben Hoch- und niedrigkonzentrierte hGH-Kontrollen


Puffer Kaliumpuffer, Phosphat-Buffer, usw.



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Protokoll



Vorbereitung


- Alle Reagenzien auf Zimmertemperatur bringen.
- Mikroplatte mit Wash-Pumpe spülen und trocknen lassen.





Proben- und Standardzugabe


- Pipettieren Sie die Probe, Standards und Kontrollen in die jeweiligen Felder (doppelt für Genauigkeit).

- Inkubation 1 h bei 37 °C oder 2 h bei Raumtemperatur.





Waschen


- Drei Mal mit Wash-Puffer, jeweils 30 s.



Sekundärantibody


- Zugabe des HRP-konjugierten Antikörpers (10 µL).

- Inkubation 30 min bei 37 °C.





Waschen


- Wieder drei Mal Waschen, jeweils 30 s.



Substrat


- Zugabe von 100 µL TMB-Substrat.

- Dunkelraum, 15–30 min Inkubation (bis Farbveränderung).





Stopplösung


- 50 µL Stopplösung hinzufügen, sofort Messung.



Messung


- Absorbanz bei 450 nm messen (±650 nm als Korrektur).




Datenanalyse


- Kurve aus den Standards erstellen und hGH-Konzentrationen der Proben berechnen.







Spezifische Angaben



Parameter Wert


Messbereich 5 pg/mL – 200 pg/mL (je nach Standard)


Sensitivität